结论:跑核酸(DNA/RNA)用水平槽,跑蛋白用垂直槽。这不是习惯问题,是凝胶类型和分辨率需求决定的。
| 你要跑什么? | 选哪个? | 核心原因 |
|---|---|---|
| DNA / RNA(琼脂糖凝胶) | 水平电泳槽 | 凝胶孔径大,水平槽完全够用,操作简单 |
| 蛋白质(SDS-PAGE) | 垂直电泳槽 | 聚丙烯酰胺凝胶必须垂直夹持,分辨率高 |
| Western Blot 前处理 | 垂直电泳槽 | 后续要转膜,垂直槽是标准配置 |
| 小片段核酸(<500bp,PAGE胶) | 垂直电泳槽 | 需要高分辨率,琼脂糖做不到 |
| 高通量筛查(96个样本) | 水平电泳槽(高通量型) | 一次跑96孔,效率碾压 |
| 对比项 | 水平电泳槽 | 垂直电泳槽 |
|---|---|---|
| 凝胶放置 | 平放,浸没在缓冲液中 | 垂直夹在两块玻璃板之间 |
| 凝胶类型 | 琼脂糖(1%~3%) | 聚丙烯酰胺(PAGE) |
| 分离对象 | DNA / RNA(几百~数万bp) | 蛋白质(1~300kDa)/ 小片段核酸 |
| 分辨率 | 较低,条带间距大 | 高,能区分分子量极接近的蛋白 |
| 样品通量 | 高(25~108个样本/次) | 低(1~4块胶/次) |
| 操作难度 | 简单,开放式,直接铺胶 | 较复杂,需制胶架、防漏胶 |
| 漏液风险 | 低 | 较高(玻璃板夹持处易漏) |
| 噪音 | 较小 | 较大(风冷/外置制冷) |
| 采购成本 | 低(~1000~3000元) | 高(~3000~8000元+电源) |
| 典型型号 | HE-120(25/50样)、HE-220(96样) | VE-180(双板)、VE-680(四板) |
| 场景 | 推荐槽型 | 推荐理由 |
|---|---|---|
| PCR产物验证 | 水平(HE-120) | 简单快速,1%琼脂糖,30分钟出结果 |
| 质粒酶切鉴定 | 水平(HE-120/HE-90) | 成本低,一次跑25个样本够用 |
| RNA完整性检测 | 水平(HE-90专用RNA槽) | 槽体小、缓冲液少、省钱 |
| 大规模核酸筛查(96样本) | 水平(HE-220) | 一次96孔,高通量首选 |
| 蛋白质分子量测定 | 垂直(VE-180双板) | SDS-PAGE标准配置 |
| Western Blot | 垂直(VE-180/VE-680)+ 湿转转印槽 | 垂直槽是WB的标配前处理 |
| 抗体筛选/蛋白纯度检测 | 垂直(VE-180) | 分辨率高,条带清晰 |
| 教学实验 | 垂直小型槽(Mini2型) | 体积小、安全、省试剂 |
| 坑 | 正确做法 |
|---|---|
| 买了垂直槽跑琼脂糖 | 琼脂糖太软,垂直夹不住,会漏胶,必须用水平槽 |
| 买了水平槽想跑SDS-PAGE | 电场方向不对,条带全是拖尾,必须用垂直槽 |
| 预算紧只买一台 | 如果你的实验室蛋白和核酸都做 → 先买水平槽(使用频率更高),蛋白实验外包或借用 |
| 忽略电源匹配 | 水平槽配EPS-100(恒压)即可;垂直槽需要EPS-300/600(恒流+恒压),买槽前先确认电源 |
| 垂直槽不用外置制冷 | 跑大胶(>12cm)不制冷会烧胶,必须配冷却装置或在4℃冷室跑 |
一句话总结:做核酸选水平,做蛋白选垂直,这是由凝胶类型决定的硬规则,不存在"都能用"的情况。如果实验室两种都做,水平槽使用频率更高、更不容易出错,优先配水平槽;蛋白实验少的话,垂直槽可以后续再补。