紫外分光光度计介绍（二）

紫外分光光度计分为单波长及双波长两大类，其中单波长分光光度计，又可分为单光束和双光束两类。下面继续介绍各类光度计。

单波长单光束紫外分光光度计：

   单波长单光束分光光度计是分光光度计中光路设计最简单的一种，它只有一条光束，通过变换参比和样品的位置，使其分别进入光路。在参比进入光路时，调零。然后将样品移进光路，样品信号自动减去参比信号，就可在电流表上或数字显示器上读出样品的透光度或吸光度。单波长单光束仪器的单色器，有用棱镜的，也有用光栅的。

单波长双光束紫外分光光度计

   单波长双光束紫外分光光度计，是近30年来开发的一种分光光度计。双光束就是在同一仪器中使用了两个完全相同的光束。这两个光束同时分别地通过参比溶液和待测溶液，以测量它们的透光度之差。

   这种分光光度计由于采用双光路方法，因此测定程序大为简化，即可直接读数，又可扫描吸收光谱，还可以增加附件，扩展仪器的使用范围。此外，双光束方法还可以排除由于光强度不稳定而引入的误差。

   双光束仪器型号较多，按其结构、性能、使用及应用新技术的情况，可分为低、中、高档仪器。低中档仪器可作为一般测定，使用方便，例如上海光谱SP-1901，高档双光束仪器都是利用微机操作和数据处理。上海光谱SP-1900、上海光谱SP-1920、上海光谱SP-2500便属于此类。

双波长双光束紫外分光光度计：

   双波长仪器主要测定浑浊样品。浑浊样品溶质颗粒造成的光散射，使表观吸光度增加，甚至引起光谱畸变。为了探索测定浑浊样品的方法，1951年Chance实验室巧妙的利用样品在峰位和峰谷的吸光度之差，准确的测定了样品的真实吸光度，设计了第一台双波长分光光度计。

   随着技术的发展，双波长分光光度计常常同时可做双光束测定。测定时，一个单色器被光闸关掉，另一单色器的光束由斩波器分成两路，进行双光束测定。

   由于双波长双光束仪器是把两个不同波长的单色光，通过同一样品后照射到同个检测器上。因此，它提供了单位时间内来自两个波长的信号。记录了两个不同波长的光吸收差，从而能对样品进行精确地测定，或跟踪样品随时间发生的变化。