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血清蛋白电泳和免疫固定电泳在多发性骨髓瘤中的应用分析

[导读]49例 MM 在免疫固定电泳中47例均可见与对应 抗血清形成单克隆条带;而在血清蛋白电泳中31例检出 M 带,其余的18例血清蛋白电泳出现不明显条带或不出 现条带的标本经免疫固定电泳分析,8例为重链型,2例为轻链型,1例IgA 型,其余为未分泌型。结 论 血清蛋白电泳和免疫固定电泳是 MM 的诊断和鉴别诊断的重要检查方法,后者有较高的敏感性和特异性。

多发性骨髓瘤(MM)又名浆细胞骨髓瘤,是以克隆性恶性浆细胞(骨髓瘤细胞)在骨髓中异常增殖,并伴有单克隆免疫球蛋白(即 M 蛋白)增多为特征的疾病[1]。M 蛋白的检测及分型对 MM 的早期诊断、鉴别诊断、分类以及判断预后就显得尤为重要。本文对本院自2007年 以 来 的49例多发性骨髓瘤患者的血清蛋白电泳和免疫固定电泳结果进行分析,现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2007年1月至2012年6月本院共收集符合 MM 诊断 标 准[1]的49例 MM 患 者,其 中 男26例,女23例,年龄30~82岁,中位年龄56岁,进行血清蛋白电泳和免疫固定电泳检测。

1.2 方法 血清蛋白电泳、血清免疫固定电泳、尿本周蛋白电泳:使用法国SebiaHYDRASYS全自动电泳仪上进行电泳分离、染 色、脱色和干燥等步骤,然后用光密度扫描仪扫描凝胶片,用SebiaEPSON 公司配套软件分析。

1.3 统计学方法 采 用 SPSS12.0统 计 软 件 包,χ2 检 验 进 行

统计分析,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结  果

2.1 血清蛋白电泳结果 49例 MM 血清蛋白电泳31例检出M 带,8例 M 蛋白分布在β区带,23例 M 蛋白分布在 γ区带,其余18例出现极不明显的或不出现 M 带,诊 断 率 为63.3%。见图1。

2.2 49例 MM 血清免疫固定电泳分析结果 49例 MM 经免疫固定后,有47例均可见与对应抗血清形成单克隆条带,各型均呈现明显浓集的浓染带,见 图2。其 中 有18例 经 SPE 电 泳后出现不明显条带或不出现条带的标本经血清免疫固定电泳分析,8例为重链型,2例为轻链型,1例IgA 型,其余为未分泌型。进一步分析结果显示,49例 MM 中,IgG 型29例(59%),为最多。在IgG型中,κ型13例,λ型16例;IgA 型8例 次 之,在IgA 型中,κ型3例,λ型5例;IgM 型较少,仅1例,为λ型,见表1。同 时 在49例 MM 中,有21例 MM 经 本 周 蛋 白 免 疫固定电泳后呈现明显浓集的浓染带。尿本周蛋白检出阳性率为42.8%。

2.3 血清蛋白、血清免疫固定以及尿本周蛋白电泳3种 方 法比较 对2007年以来的49例 MM 患者血清或尿液标本分别用血清蛋白、血清免疫固定以及尿本周蛋白电泳3种方法进行检测,结 果 显 示,3 种方法检测结果具有 统计学意义 (χ2 =33.85,P<0.01)。见表2。

讨  论

MM 是一种单克隆浆细胞异常增殖的恶性肿瘤,异 常 浆细胞浸润骨髓和软组织产生 M 蛋 白[1],并以单克隆免疫球蛋白增高为特征,由于恶性增生的浆细胞浸润骨髓,导致溶骨性病变,剧烈骨痛,病理性 骨 折,又因瘤细胞侵犯多个脏 器,临 床表现形式多样化,临床易发生误诊和漏诊,误 诊 率 高[2]。本 文许多病例未有骨痛、病理性骨折,绝大多数病例临床症状不典型。MM 患者有明显的年龄指征,多见于中老年人,青壮年少见或罕见,该病近年来有逐渐增加趋势。以 往 MM 患 者 只 有做骨髓细胞学检查才能诊断,但因骨髓常出现干抽,稀释,灶性分布或骨髓纤维化而致漏诊[3]。本 文 对2007年 以 来 的49例MM 患者血清或尿液标本分别用血清蛋白、血清免疫固定以及尿本周蛋白3种电泳方法进行检测,血清免疫固定电泳和血清蛋白电泳检测出阳性率较高,检出阳性率分别 为95.91%和63.30%,表明血清蛋白电泳和免疫固定电泳是 MM 的诊断和鉴别诊断的重要检查方法,为 MM 疾病的早期诊断提供及时、准确的实验室依据。

血清蛋白电泳是分离蛋白质最简单的方法之一,可以获得有关血浆蛋白 质 全 貌 的 图 谱,并对血清中异常蛋白质进行筛选[4]。本文采用sebia全自动电泳系统对49例 MM 患者进行血清蛋白电泳,在β或 γ区发现一单克隆带,经 扫 描 显 示 基 底窄、波峰高而尖的典型 M 蛋 白 特 征。结果出现蛋白带的阳性率为63.3%,血清蛋白电泳不是确诊试验,但是它具 有 结 果 准确、重复性好、分辨率高的优点,可清晰地将各蛋白区带显示出来,观察电泳特征性图谱及测定值较全面,直观地反映蛋白质的分离程度和各种变化,可为多种疾病如 MM、肝 硬 化 和 恶 性肿瘤等疾病提 供 准 确、可靠的诊断依据及其治疗都有一定的意义。

免疫固定电泳技术是目前最广泛地用于鉴别 M 蛋白的方法之一,有文献报道90%以上的 MM 患者血清及尿中可检测到 M 蛋白,是 MM 的重要诊断指标之一[5-6]。本 文 中 血 清 蛋白电泳的检出率63.3%,免疫固定电泳检出率达95.91%,免疫固定电泳检出率明显高于血清蛋白电泳,而且通过免疫固定电泳还可以直接判断 M 蛋白类型。不同的免疫球蛋白类型会出现不尽相同的临床结果,如IgG 型极易诱发感染;IgA 型MM 易聚集成多聚体而引起高黏滞血症,易引起高钙血症和高胆固醇症;IgM 型 MM 发病年龄相对较年轻,易 见 髓 外 浸润,骨质硬化等;轻链型 MM 由于瘤细胞合成的异常免疫球蛋白重链比例失衡,过多的轻链分泌,而轻链分泌又很小,可通过肾小球,沉积于肾小管 上 皮 细 胞,使 之 变 性,造 成 肾 功 能 损 害,其中又以μ链引起的 肾 功 能 损 害 最 为 多 见。有 文 献 报 道IgA型和轻链型预后较差[6],所以免疫固定电泳通过对 M 蛋 白 的分型,对 MM 的预后治疗具有一定意义,而且简便切实可行,适用于临床常规应用。作者认为近年来本病的发病率确有增加趋势,发病率的增高应与先进医疗技术在临床的应用有很大关系,也是检出病例增多的重要因素。

在临床实践中,凡遇中老年患者血清总蛋白和球蛋白明显增高,清蛋白降低,清蛋 白/球蛋白比率严重倒置,尿 蛋 白 阳 性或慢性肾炎,肾衰竭,贫血患者,均应考虑 MM 的可能,应建议临床做骨髓检查、血清蛋 白 电 泳、免疫固定电泳等相关检查以求确诊。

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